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HPLC/UHPLC兼容色譜柱常見故障判斷及排除方法
  • 更新日期:2019-09-26     信息來源:本站      瀏覽次數(shù):2343
    • HPLC/UHPLC兼容色譜柱常見幾種故障判斷及排除方法

      1.柱壓?jiǎn)栴}柱壓?jiǎn)栴}是使用色譜過程中需要密切注意的地方,柱壓的穩(wěn)定與色譜圖峰形的好壞、柱效、分離效果及保留時(shí)間等密切相關(guān)。
      壓力過高:
      這是液相在使用中常見的問題,指的是壓力突然升高,一般都是由于流路中有堵塞的原因。此時(shí),我們應(yīng)該分段進(jìn)行檢查。
      (1)先斷開真空泵的入口處,此時(shí),PEEK管里充滿液體,使PEEK管低于溶劑瓶,看液體是否自由滴下,如果,液體不滴或緩慢滴下,則是溶劑過濾頭堵塞。
      處理方法:
      用30%的硝酸浸泡半個(gè)小時(shí),在用超純水沖洗干凈。如果液體自由滴下,溶劑過濾頭正常,再檢查;
      (2)打開Purge閥,使流動(dòng)相不經(jīng)過柱子,如果壓力沒有明顯下降,則是過濾白頭堵塞。
      處理方法:
      將過濾白頭取出,用10%的異丙醇超聲半個(gè)小時(shí)。如果壓力降至100PSI(6.7Bar)以下,過濾白頭正常,再檢查;
      (3)把HPLC/UHPLC兼容色譜柱出口端取下,如果壓力不下降,則是柱子堵塞。
       
      處理方法:
      如果是緩沖鹽堵塞,則用95%的水沖至壓力正常。如果是一些強(qiáng)保留的物質(zhì)導(dǎo)致堵塞,則要用比現(xiàn)在流動(dòng)相更強(qiáng)的流動(dòng)相沖至壓力正常。
      假如,按上面的方法長(zhǎng)時(shí)間沖洗壓力都不下降,則可考慮將柱子的進(jìn)出口反過來接在儀器上,用流動(dòng)相沖洗柱子。這時(shí),如果柱壓仍不下降,只有換柱子入口篩板,但是,一旦操作不甚,很容易造成柱效下降,所以,盡量少用。

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