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　　UHPLC反相色譜柱的使用：

　　在使用前，進(jìn)行柱的性能測試，并將結(jié)果保存起來，作為今后評價(jià)柱性能變化的參考。在做柱性能測試時(shí)要按照出廠報(bào)告中的條件進(jìn)行，只有這樣，測得的結(jié)果才有可比性。但要注意：柱性能可能由于所使用的樣品、流動相、柱溫等條件的差異而有所不同。

 

　　UHPLC反相色譜柱的操作方式：

　　1、在條件允許情況下，在使用前對新色譜柱按照說明書方法進(jìn)行柱效測試。以確保色譜柱的正常。

 

　　2、所有硅膠基質(zhì)色譜柱使用溫度應(yīng)低于60℃。

 

　　3、樣品

　　將樣品溶解在流動相或極性相近的溶劑中。如果使用梯度洗脫，則需要將樣品溶解在初始流動相或極性相近的溶劑中。樣品溶液不應(yīng)含有任何顆粒物，使用0.5μm或更小粒徑的濾膜過濾。樣品溶液如果使用強(qiáng)溶劑（例如，流動相為水，樣品溶劑為甲醇），為達(dá)到較好峰形，需要降低進(jìn)樣量（以250x4.6mm規(guī)格為例，小于10μL）。

 

　　4、流動相

　　所有流動相，特別是含有緩沖鹽的流動相，當(dāng)日實(shí)驗(yàn)當(dāng)日配制；如果使用了前日配制的流動相，請確保流動相pH值沒有變化，并確保流動相沒有長菌。流動相的pH值取決于您的應(yīng)用和色譜柱填料類型。